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一、層析柱的清洗
（一）、溶液的配制：
1、0.5M NaOH:用天平稱取 200g，加蒸餾水至 10L。
2、0.5M HCL:用量桶量取 417ml，加蒸餾水至 10L。
（二）、清洗步驟：
1、 將購買之層析柱拆開，用清水清洗，以去除粘附在玻璃柱、裝柱器及柱塞上的灰塵污物。然后，將柱按原樣安裝，擰緊底座密封圈，用止血鉗夾住底座出水管口，若有裝柱器，則將其裝在層析柱的上端。緩緩注入蒸餾水，靜止 10 分鐘，并觀察層析柱有無漏水、滲水現象。
2、 廢棄柱內蒸餾水，將上端柱塞及管道（包括柱塞上管道，蠕動泵上管道以及監
測儀上管道）放入空柱內，緩緩注入 0.5M NaOH 溶液至柱頂，打開柱底端出水口，使出水管道內充滿 0.5M NaOH 溶液，然后夾住關口，浸泡過夜。
3、 廢棄柱內 0.5M NaOH 溶液，代之以 0.5M HCL 溶液浸泡過夜，方法與“2、”相同。
4、 廢棄柱內 0.5M HCL 溶液，用蒸餾水反復沖洗玻璃柱及管道至中性。（可用 PH試紙測試流出液來判斷）此時，層析柱清洗完畢。
注：清洗干凈的層析柱，應無水珠掛壁現象！
二、層析柱介質的使用
（一）、裝柱：
1、 脫氣泡：用蒸餾水緩緩注入洗凈的層析柱內，打開柱底端出水口，使出水管道氣泡排出，充滿蒸餾水，用止血鉗夾住管口，再用蠕動泵抽取層析柱底端柱塞上的氣泡。
注意：抽氣泡時，蠕動泵的進水管口應平整，伸入層析柱內管口應緊貼底端柱塞，并與其相切，以利于脫氣徹底。抽氣泡時，應保持柱內蒸餾水不被完全抽干，至脫氣泡完畢時，柱內仍保持一定量的蒸餾水（約柱長的 1/4 高度）。
2、 校正水平：將水平儀平放于層析柱的頂端，通過調節柱底座的螺絲使層析柱水平。
3、 介質的安裝：將待裝層析介質（凝膠懸濁液）充分搖勻，沿玻璃棒緩緩注入脫氣完畢的層析柱內：然后用玻璃棒沿柱內壁緩慢攪動介質，使其均勻分布于柱內；靜止30 分鐘，待介質自然沉淀后，將蠕動泵、監測儀與柱底出水口連接，啟動蠕動泵，根據實驗需要控制流速，抽取液面；最后，去除裝柱器，裝上頂端柱塞，并擰緊密封圈。
注意：層析介質（凝膠懸濁液）應盡量一次性裝入，以避免出現介質分層現象。若出現介質分層現象，則應重復“介質的安裝”步驟。
（二）、清洗：
將層析柱上端管口插入蒸餾水內，下端出水口與蠕動泵相接，通過蠕動泵，用蒸餾水過柱 10 柱床體積，流速根據介質性質與實驗要求而定。
三、層析一般方法：
平衡→上樣→洗滌（去除不分雜質）→洗脫目的物質（通過檢測儀將信號傳至記錄儀，根據記錄儀上的洗脫峰收集實驗目的物）→再生（去除殘留于介質上的所有雜質，以便介質的再次使用）。
注:層析各步中所使用的溶液均根據實驗要求而定。