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DE0009-1ml
1ml
¥50.00
PCR/RT-PCR/qPCR
DE0009-5ml
5ml
¥180.00
PCR/RT-PCR/qPCR
產品描述
產品描述:
本制品是將PCR反應所需的Taq酶、dNTPs、MgCl2以及反應緩沖液預先配制成2倍濃度的混合物。2×PCR Master專為常規PCR擴增反應優化,擴增長度可達8kb,能對4kb及其以下長度的片段進行高效地擴增。使用時只需再加入模板和引物并稀釋到1倍濃度即可進行PCR反應,大大地簡化了操作過程,減少了PCR操作過程中的污染。經測試,染料的加入不影響PCR反應,在PCR反應完成后可直接電泳,節省時間。
產品特點:
高效:以λDNA為模板,擴增長度可達8kb,能高效擴增≤4kb片段。
靈敏:可從0.05ng人基因組DNA模板中擴增出特定基因片段。
穩定:反復凍融幾十次,4℃放置30天,室溫放置一周后,擴增性能不受影響。
快捷:PCR反應所必需試劑全集于一管之中,數分鐘即可完成反應體系配制。
便利:PCR反應后可直接電泳(含染料形式)。
產品用途:
1)常規PCR鑒定;
2)小片段目標基因克??;
3)平端PCR產物加A。
使用建議:
使用本試劑擴增得到的PCR產物3′端有一突出"A"堿基,可直接克隆于T載體中。
保存溫度:-20℃
質量保證:
經檢測無外源核酸酶殘留,qPCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留,能有效擴增人基因組中的單拷貝基因。
常用反應體系(50μl)
2×PCR Master | 25μl |
上游引物 | 0.2-1.0μM(終濃度) |
下游引物 | 0.2-1.0μM(終濃度) |
模板 | 1-50ng(質粒) 10ng-1μg(基因組) |
ddH2O | 至50μl |
*Mg2+終濃度為2mM
常用PCR循環
注意事項:
1) 需要溶解完全后使用,防止離子濃度不均勻。
2) 應根據實驗目的選擇合適的循環數,循環數過少,會造成擴增量不足;循環數過多,擴增量增加,但突變率也會增加,并造成特異性擴增。
3) 根據引物Tm值設置合適退火溫度,退火溫度過低,會造成非特性擴增,過高可能擴增不到。