亚洲国产欧美在线人成aaaa20-欧美大片看一区二区三区-51久久夜色精品国产麻豆-国产日产欧美a一级在线直播

中文名稱：SUPER Green I(效果同 SYBR Green I)核酸染料(10,000×DMSO 溶液)(電泳級)

貨號：DE0133-50μl

規格：50μl

保存條件：-20°C 避光保存

    本品用 DMSO 溶解，因 DMSO 的熔點是 18.5℃，使用前請放置到室溫充分溶解。

一、膠染法(用法同 EB)(推薦方法，見圖 1)

1、制膠時加入 SUPER Green I 核酸染料。冷卻膠至 50℃左右，每 100ml 膠中加入 3～5μl SUPER Green I 核酸染料。

2、按照常規方法進行電泳即可。

注：此方法染色可以準確確定核酸片段分子量，染料用量相對較少。1ml 染料大約可以做 300塊 100ml 的膠。

二、點染法 (見圖 3) 

1、該方法適于瓊脂糖凝膠電泳和 PAGE 凝膠電泳。

2、工作液的配制：用電泳緩沖液將 10000×的 SUPER Green I 稀釋 100 倍，即為 SUPERGreen I 工作液。SUPER Green I 工作液可以置 2～8℃保存一個月以上。

3、制膠：按常規方法制膠，不含任何染料。4、樣品染色：向分析樣品中加入 SUPER Green I 工作液和載樣緩沖液，室溫放置 10 分鐘，使 SUPER Green I 與樣品中 DNA 充分結合。SUPER Green I 工作液加入量為總上樣量的 1/5～ 1/10。

5、DNA Marker 染色：將 5μl DNA Marker、5μl DNA Marker 稀釋液和 1μl SUPER Green I 工作液混勻，室溫放置 5 分鐘，使 SUPER Green I 與 DNA 充分結合。

6、上樣、電泳：按常規操作。

注：用點染法染色時，靈敏度最高，染料用量最少。但大片段稍有滯后現象，如果需要更準確確定分子量(與 Marker 對比)，建議使用膠染法。

三、泡染法

1、按照常規方法進行電泳。

2、用 pH 7.0～8.5 的緩沖液(如：TAE，TBE 或 TE)，按照 10000﹕1 的比例稀釋 SUPERGreen I 濃縮液，混勻，制成染色溶液。

3、將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中，放入凝膠，用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色 10～30 分鐘，染色時間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色，將配好的稀釋溶液輕輕地倒在膠板上，讓稀釋液均勻地覆蓋整個膠板，并染色 30分鐘。玻璃平皿必須預先經過硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

注：用泡染法染色時，可以精確確定核酸片段分子量。但染料用量是三種方法中最多的。

四、點染+膠染法(見圖 2) 

此法結合方法 1 和方法 2，靈敏度最高，對于低濃度樣本比 EB 檢測更靈敏。幾種染色方法特點比較

SUPER Green I 使用注意事項

1、在 SUPER Green I 點染法中，電泳時間不要超過 2 小時，否則 SUPER Green I 會從DNA 上分離出來，會產生彌散狀條帶。

2、用點染方法染色時，條帶稍有滯后現象，如果需要確定片段精確分子量(與 Marker 對比)，建議使用膠染法(方法 1)。

3、在常規用酒精沉淀核酸的過程中，SUPER Green I 可以全部從雙鏈核酸上去掉。

4、如果想對用 SUPER Green I 染過的膠進行 Southern blots，建議在預雜化和雜化溶液中加入 0.1%～0.3% 的 SDS。

5、在紫外照射透視下，與雙鏈 DNA 接合的 SUPER Green I 呈現綠色熒光。如果膠中含有單鏈 DNA 則顏色為橘黃而不是綠色。

6、SUPER Green I 對玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。