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產品簡介：

Hoechst 33258，也稱 bisBenzimide H 33258 或 HOE 33258，是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞

的毒性較低。Hoechst 33258 染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258

也常用于普通的細胞核染色，或常規的 DNA 染色。Hoechst 33258 的最大激發波長為 346nm，最大發射波長為

460nm；Hoechst 33258 和雙鏈 DNA 結合后，最大激發波長為 352nm，最大發射波長為 461nm。本 Hoechst 33258

染色液可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色，也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。

使用說明：

1. 對于固定的細胞或組織：

a. 對于細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒

光染色，染色完畢后再按后續步驟進行 Hoechst 33258 染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續的 Hoechst

33258 染色。

b. 對于貼壁細胞或組織切片，加入少量 Hoechst 33258 染色液，覆蓋住樣品即可；對于懸浮細胞，至少加入

待染色樣品體積 3 倍的染色液，混勻。室溫放置 3-5 分鐘。

c. 吸除 Hoechst 33258 染色液，用 TBST、PBS 或生理鹽水洗滌 2-3 次，每次 3-5 分鐘。

d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發生凋亡時，會看到凋亡細胞的細胞核呈致密

濃染，或呈碎塊狀致密濃染。

2. 對于活細胞或組織：

a. 加入適當量 Hoechst 33258 染色液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對于六孔板一個孔需加入 1ml 染

色液，對于 96 孔板一個孔需加入 100 微升染色液。

b. 在適宜于細胞培養的溫度下培養 20-30 分鐘。棄染色液，用 PBS 或培養液洗滌 2-3 次即可進行熒光檢測。